Co je bakteriologický výzkum? Podle jakého schématu se to provádí? Co se v tomto případě rozumí bezpečností? Jaké jsou cíle a fáze bakteriologického výzkumu?
Obecné informace
Bakteriologické vyšetření je vědecký proces, při kterém se identifikují bakterie a studují se jejich vlastnosti za účelem stanovení mikrobiologické diagnózy. Zde je velmi důležité určení typu nebo druhu výsledného mikroorganismu (předpokládá se čistá kultura). To je doprovázeno studiem biochemických a fyziologických vlastností organismů a také sklonem k tvorbě toxinů. Pro tyto účely se používají srážecí a aglutinační reakce. Praktikuje se také k infekci laboratorních zvířat s následným zjištěním patologických změn.
Práce s testovacím materiálem
Algoritmus bakteriologické studie zajišťuje přísné dodržování speciálních pokynů. Testovaný materiál tedy musí být shromažďován ve sterilních miskách za aseptických podmínek. Je třeba se také staratzajistit dodání do laboratoře co nejdříve. Skladování vzorků v chladu je žádoucí. Technika bakteriologického výzkumu poskytuje mnoho možných situací. Typ předmětu, vlastnosti mikroorganismu a povaha onemocnění tedy často vyžadují vypracování individuálních pokynů pro práci. V práci je použito velké množství různých metod. Jednou z nejčastějších je bakterioskopie. Ale pokud nejsou bakterie fixovány, pak se používá drcená nebo visící kapka. Je třeba poznamenat, že poslední dvě možnosti se vyznačují zvýšenou úrovní nakažlivosti.
Bakterioskopie
V tomto případě se používají tahy. Chcete-li je vytvořit, musíte rozdělit kapku studované kapaliny po povrchu podložního sklíčka. Zates by to měl usušit. To se často provádí pohybem drogy plamenem získaným z plynového hořáku. I když jako alternativu lze použít fixační směsi. Pro označení toho, že s tímto přípravkem byly provedeny přípravné akce, je obarven. Účelem takové manipulace je přesnost, která je velmi důležitá při mikroskopickém a bakteriologickém vyšetření. Pokud totiž drogu znovu použijete k jinému účelu, získáte kaši, se kterou bude velmi obtížné efektivně pracovat.
Proč je bakterioskopie tak populární
V neposlední řadě díky dostupnosti této metody. Pokud se provádí bakteriologická studie čerstvého přípravku, pak k určení patogenulze použít mikrochemické reakce nebo selektivní barvení různých strukturních částí mikroorganismu. Který je lepší? Přesnější výsledek lze získat při práci s barevným přípravkem. V tomto případě se testovaný materiál nanese na předem připravené podložní sklíčko. A nezapomeňte na tenkou (a pokud možno rovnoměrnou) vrstvu. Poté musíte počkat, až droga zaschne na vzduchu. Mikroorganismy se poté fixují jednou z běžných metod. Poté se vychlazený přípravek podrobí barvení diferenciálním nebo jednoduchým nátěrem. K tomu lze použít suché a nativní přípravky. Poté zbývá nasměrovat do místa hromadění organismů ultrafialové nebo krátké modré paprsky, které způsobí, že celý mikrob nebo určité části jeho těla září.
Praktická aplikace bakterioskopie
Používá se k diagnostice řady infekčních onemocnění. Nejznámější z nich jsou tuberkulóza, kapavka a recidivující horečka. Kromě toho se uchylují k výzkumu, aby studovali celý komplex mikroflóry orgánu nebo produktu. Kritici však často poukazují na relativní nespolehlivost a nepřesnost této metody.
Plodiny a subkultury bakteriálních kultur
Proveďte je pomocí Pasteurovy pipety. Provedení bakteriologického a cytologického vyšetření je často obtížné provést bez inokulace a subkultivace během pracovního postupu. Při práci s Pasteurovou pipetou její hrotodlomit pinzetou. Samotný nástroj se pak nese plamenem hořáku a nechá se vychladnout. Mimochodem, k setí lze použít tekuté i pevné živné půdy. Výběr je ovlivněn tím, jaké cíle bakteriologického výzkumu jsou sledovány. Zároveň je nutné dodržovat algoritmus práce a bezpečnostní opatření. Při práci s tekutým živným médiem je tedy nutné dbát na to, aby nevytekla a nenamáčela okraje korku a zkumavek. Když se studie provádí s pevným materiálem, často se ke vstupu do kultury používá speciální jehla. Při setí a dosévání by se měly provádět v blízkosti plamene plynového hořáku. Pro čistotu experimentu by zkumavka neměla zůstat dlouho otevřená. Pokud jde o nástroj s kulturou: měli byste se ujistit, že se ničeho nedotýká. Technika bakteriologického výzkumu také umožňuje spálit okraje zkumavky před jejím uzavřením. Hotový produkt by měl být podepsán ihned po výrobě, aby se předešlo budoucím nejasnostem.
Účinnost setí
Předpokládá se, že tato metoda umožňuje získat přesnější a spolehlivější údaje během bakteriologické diagnostiky než dříve zvažovaná bakterioskopie. V tomto případě je algoritmus akcí následující:
- Zpočátku se čistá kultura nanese na povrch živného média, které se nalije do Petriho misky.
- Počáteční výsev by měl být proveden v podmínkách, které jsou příznivé pro daný druhmikroorganismy.
- Po dni nebo dvou, za přítomnosti optimálního prostředí, se všechna vhodná včelstva přesunou tam, kde se mohou maximálně rozvíjet. Tím je osvobodí od cizí mikroflóry.
Konečným výsledkem je kultura homogenních bakterií, kterou lze identifikovat.
Čisté kultury
Jak se ale vyrábí? K tomu se používají biologické a mechanické metody. V prvním případě hrají velkou roli živná média, kde jsou nezbytné podmínky příznivé pro rozvoj konkrétní kultury. Tento přístup lze také použít, když se nakazí laboratorní zvířata vnímavá ke konkrétnímu typu bakterií. Mechanické metody jsou založeny na použití sterilního nástroje, kterým se kultura umístí do živného média umístěného v první, druhé a třetí Petriho misce. Pak je třeba počkat, až vyrostou jednotlivé kolonie a z nich již vynikne čistá kultura. Bakterie lze pěstovat i ve speciálních termostatech, kde se teplota udržuje na určité úrovni (obvykle asi 37 stupňů). V tomto případě proces pokračuje asi den. Ale v závislosti na typu mikroorganismů mohou být stanoveny další termíny. Důležitá je také přítomnost potřebné koncentrace kyslíku. K tomu použijte různé způsoby provzdušňování. Doposud jsme mluvili o situaci jako celku a obecně, ale nyní zaměřme svou pozornost na to, jaké je schéma bakteriologického výzkumu.
Cvičení
K detekci patogenních mikroorganismů v těle pacienta nebo potenciálního nosiče se často používá soubor metod. Použité materiály a metody závisí na cílech analýzy a také na podmínkách prostředí, ve kterém se práce provádí. V praxi se bakterie nejčastěji zjišťují prostřednictvím hemokultur odebraných člověku nebo zvířeti. Pokud jsou dobře definované lokální léze, lze v problémových oblastech hledat patogeny. To je typické pro taková onemocnění, jako je úplavice, kapavka, záškrt a řada podobných. Ve zvláště závažných případech je tento proces rozdělen do samostatných fází bakteriologického vyšetření (které je typické pro břišní tyfus). Každý z nich používá své vlastní metody, které jsou zaměřeny na nalezení původce infekce. Podívejme se blíže na situaci s břišním tyfem. V prvním týdnu onemocnění jsou nejspolehlivějším způsobem diagnózy onemocnění hemokultury. Za druhé se za takovou považuje sérologická studie. Ve třetím týdnu se vyšetřuje stolice. Za poslední metodu se považuje kontrola rekonvalescentů.
Identifikace mikroorganismů
Začíná to procesem barvení. Pak se podívají na to, jak bakterie dokáže rozkládat sacharidy, aminokyseliny a tak dále. Tento proces může být navíc doplněn studiem dalších vlastností, které má každý jednotlivý rod nebo druh mikroorganismů. Jako příklad je třeba uvést možnosti rozpouštění erytrocytů různých zvířat, vliv na koagulaci krevní plazmy a rozpouštění sraženiny.fibrin a tak dále. To vše jsou rozdílné rysy jednotlivých zástupců mikrosvěta. Pro konečné rozpoznání lze také použít sérologickou identifikaci (to se ale obvykle týká patogenních bakterií, které patří do střevní rodiny).
Závěr
Je třeba poznamenat, že řadu mikroorganismů nelze identifikovat metodami popsanými v článku. V tomto případě se široce používá praxe infikování laboratorních zvířat. Výpočet je proveden na základě skutečnosti, že se objeví charakteristická toxigenita nebo patogenita, která není pozorována v umělých podmínkách. Infekce může být také použita jako metoda pro akumulaci patogenních mikrobů. A již při porovnání charakteristik studované kultury, zjištěných v procesu studia biologických, morfologických, sérologických a biochemických vlastností, lze říci, že je známo, s jakými mikroby máme co do činění. Identifikací se rozumí označení rodu, druhu a typu bakterie. Pokud se zkoumaný mikroorganismus v určitých vlastnostech odchyluje od své typické charakteristiky, musí to být uvedeno. Řada odborníků se domnívá, že v takových případech bude užitečné znovu se ztotožnit s duplikací všech používaných metod a technik. Někdy lze výzkum posunout na další úroveň, což vyžaduje serióznější (a nákladnější) přístup. Pokud byly získány negativní výsledky, znamená to, že přípravekmikroorganismy chyběly nebo nebyly životaschopné. Ale pro přesnost výzkumu, pokud je podezření na několik bacilonosičů (úplavice, záškrt, břišní tyfus), jsou v takových případech uvedeny opakované kontroly. To je nezbytné, aby specialisté měli přesnou představu o tom, s čím se musí vypořádat.
