Testování krevního nátěru je poměrně běžná metoda, která vám umožňuje rychle diagnostikovat mnoho běžných poruch. Hlavními podmínkami pro efektivní použití této diagnostické metody je přísné dodržování techniky přípravy nátěru a systematické studium v souladu s algoritmem.
V praxi není zdaleka vždy možné získat objektivní data v rámci využití hematologické rychlé diagnostiky. Studium krevního nátěru umožňuje poměrně rychle upřesnit a doplnit přijaté informace. Tato technika umožňuje identifikovat některé prvky, které se neobjeví během klinických automatizovaných studií, například změnu tvaru erytrocytů spolu s posunem indexu leukocytů doleva, tj. směrem k nezralému neutrofilu, nebo přítomnost parazity. V některých situacích tato technika umožňuje definitivní diagnózu.
Výzkumný algoritmus
Je další:
- Bezprostředně po odběru musí být krev rychle umístěnaantikoagulační zkumavka pro udržení kvality buněk.
- Methylenová modř umožňuje identifikaci retikulocytů.
- Vyhodnocení se provádí na tenké vrstvě nátěru s odečtem na úrovni jeho copánků pod mikroskopem.
- Prováděním systematického zkoumání krevního nátěru je myšlen algoritmus APEL.
K čemu se tato analýza používá?
Pro tyto účely:
- V rámci určování nepravidelností tvaru a velikosti, jakož i změn v počtu červených krvinek, krevních destiček, bílých krvinek a různých typů krvinek (včetně všech nezralých forem) spolu s jejich procentem.
- Pro diagnostiku různých onemocnění spojených s narušeným vzděláním, funkcemi nebo nadměrnou destrukcí tvarovaného prvku.
- Sledovat tvorbu buněk se stupněm jejich zralosti u leukémie, po léčbě ozařováním a také jako součást poruchy tvorby hemoglobinu.
Kdy je tato studie objednána?
V případě, že je podle výsledku obecného rozboru a leukocytárního vzorce (který je předepsán pro nejširší spektrum indikací) zjištěn významný nárůst počtu leukocytů, atypických nebo nezralých buněk, pak by měl být odebrán krevní nátěr. Mimo jiné je důležité provést takovou studii v řadě takových situací:
- Na pozadí podezření na onemocnění, které postihuje buňky.
- Při užívání léků, které mohou ovlivnit jejich produkci.
Jako součástPro analýzu krevního nátěru lékaři obvykle používají žilní nebo kapilární biologickou tekutinu.
Příprava
Při odběru vzorků biomateriálu s průměrným průměrem rozšíření žíly by měla krev rychle téci do zkumavky, která obsahuje antikoagulant. Ethylendiamintetraacetát se často používá, protože umožňuje lépe konzervovat studovaný tvarový prvek. Pravda, aby se zabránilo různým druhům morfologické degradace buněk, měl by být časový interval mezi odběrem čerstvého a dobře homogenizovaného biomateriálu a přípravou preparátu co nejkratší.
Příprava nátěrů začíná odebráním kapky krve (obvykle pouze jedné z kapiláry) na okraj mikroskopického sklíčka. Poté se roztírá pomocí druhého skleněného prvku klouzajícího přes první. Dobře připravený stěr má na konci tzv. „kočičí jazyk“, což naznačuje, že vzorek byl proveden správně, a umožňuje provést vysoce kvalitní vyšetření.
Coloring
Obarvení se provádí standardní metodou. Před touto procedurou se připravený krevní nátěr vysuší na vzduchu protřepáním podložního sklíčka, což umožňuje zabránit vzniku nezbarvené světelné zóny ve středu erytrocytů. Z tohoto důvodu je chybná interpretace hypochromie vyloučena.
Mohou existovat další barevné artefakty. Například Wrightova skvrna poskytuje sraženinu. To se stane, kdyžbarva nebyla po určité době obnovena, podložní sklíčko bylo delší dobu v barvicím roztoku nebo bylo špatně umyté. V důsledku toho lze nahromadění barviva interpretovat jako přítomnost parazitů a bakterií v krvi. Kromě toho lze barvení nátěru buněčnou morfologií změnit kontaktem sklíčka s parami formalínu. Vzorky jsou obvykle barveny podle Romanovského metody založené na methylenové modři a eosinu.
Klasické zbarvení krevních nátěrů se zpravidla výrazně liší od rychlého. V poslední době mají tyto způsoby své výhody, protože jsou odolné vůči změnám kyselosti roztoků a tvorbě depotu látky. Jsou však méně účinné při detekci polychromatofilů a nemění barvu granulí bazofilů a žírných buněk.
Abyste získali vizuální specifický obraz retikulocytů, je nutné barvení novou methylenovou modří. V plastových zkumavkách je kapka krve smíchána se dvěma prvky NBM. Zkumavka se ponechá při pokojové teplotě po dobu deseti minut. Malá kapka po promíchání se umístí na podložní sklíčko a rozetře se stejným způsobem jako při stěru. Podložní sklíčko je poté rychle vysušeno na vzduchu a zkoumáno pod mikroskopem při velkém zvětšení.
Systematické studium
V rámci hodnocení je nesmírně důležité řídit se jednotným výzkumným schématem. Mikroskopie krevního nátěru, který se provádíjedna tenká vrstva se zaoblenou špičkou směrem k základně zesiluje. Buňky jsou hodnoceny na tenkém výkresu, protože tlustý nese málo informací. Při malém zvětšení je okrajová část nátěru, zejména jeho zaoblený konec, obvykle vyšetřována pro detekci agregátů krevních destiček nebo atypických širokých buněk (lymfoblasty nebo dendritické elementy).
Vrstva může mít klikatý nebo pigtailový tvar, což vám umožňuje jasně pozorovat různé krvinky ve studii řízené APEL, kde A naznačuje další atypické elementy s parazity, P znamená krevní destičky, E znamená erytrocyty a L přibližně bílé krvinky.
Vyšetření krevního nátěru je poměrně běžná technika, která vám umožňuje rychle diagnostikovat různé běžné poruchy. Hlavními podmínkami pro efektivní aplikaci této metody je důsledné dodržování techniky vyšetření stěru se systematickou analýzou v souladu s algoritmem postupu.
Co znamenají výsledky?
Změna v krevním nátěru neumožňuje vždy stanovit diagnózu. Obvykle to ukazuje na přítomnost určité nemoci, což znamená následné vyšetření za účelem stanovení přesné diagnózy.
Odůvodnění analýzy
Je poměrně velká škála nemocí a zároveň poruch, proti kterým se mohou změnit vlastnosti buněk, které cirkulují v krevním řečišti. Normálně do tohoto biomateriálu pronikají z kostní dřeně pouze zralé prvky,ale u řady patologií, například u leukémie, se do ní mohou dostat nezralé analogy ve formě blastů. U některých chorobných stavů, např. při masivních infekcích, se mohou v leukocytech objevit charakteristické nečistoty, samotné buňky se stávají atypickými, jako např. u infekční mononukleózy.
Při nedostatku železa nebo vitaminu B12 s vrozenou poruchou syntézy hemoglobinu se mohou změnit vlastnosti a vzhled červených krvinek. Detekce takových patologických buněk v nadměrném množství v nátěru umožňuje podezření na patologii, která je způsobila, a předepsat pacientovi další vyšetření. Krevní nátěr lze pravidelně předepisovat lidem s onkologickým onemocněním kostní dřeně nebo lymfatických uzlin v rámci sledování dynamiky a sledování účinnosti terapie.
