V článku se zamyslete nad tím, co to je - PCR diagnostika? Lidský papilomavirus (HPV) je dnes velmi časté onemocnění, které se vyskytuje v chronické formě a je plné častých recidiv. Polymerázová řetězová reakce (PCR) je nejmodernější metodou diagnostiky papilomaviru. Tato metoda je považována za velmi spolehlivou a pomáhá identifikovat nejen přítomnost tohoto viru v lidském těle, ale také jeho množství a rozmanitost. PCR analýza na HPV je citlivá i na neaktivní formy viru, u kterých nejsou žádné vnější projevy v podobě genitálních bradavic a papilomů.
Na čem je metoda založena?
Založeno na studii DNA pacienta za účelem zjištění přítomnosti cizích složek v tomto řetězci. Skládá se ze čtyř nukleotidů, které jsou uspořádány ve specifické sekvenci. Pokud se virus dostane do těla, dochází ke změně pořadí v tomto řetězci, což umožňuje pečlivě sledovat aktivitu i těch nejnepatrnějších cizích částic. Technika výzkumu HPV PCR se provádí pomocí virových částic, které určují rychlost buněčného dělení.
Co definuje výzkum?
Tento diagnostický princip umožňuje sledovat aktivitu HPV nejen v pasivním stavu, ale také během inkubační doby. PCR diagnostika určuje:
- přítomnost HPV v těle;
- kmeny, které infikují pacienta;
- kvantitativní obsah v těle.
Papilomavirus infikoval většinu lidí, ale silná imunitní obrana potlačuje jeho projevy a neumožňuje množení. Kvalitativní průkaz HPV tedy nelze vždy ospravedlnit, jelikož virové částice v těle nejsou racionální, ale jejich dopad je tak minimální, že člověka nijak nepoškodí. Kvalitativní analýza ukazuje pozitivní výsledek, což člověka často mate.
Kvantitativní metoda
Pro diagnostiku se proto nejčastěji používá kvantitativní metoda, která umožňuje sledovat počet virových agens v těle a určit, jak nebezpečná je jejich aktivita. Kromě toho je důležité stanovit rozmanitost kmenů HPV. Dělí se podle stupně onkogenity: některé se mohou stát hlavním faktorem vzniku onkologických onemocnění, jiné jsou naprosto bezpečné a mohou způsobit jen některé kosmetické problémy.
Každá individuální situace vyžaduje individuální přístup,proto je vhodné před absolvováním tohoto laboratorního testu poradit se s kvalifikovaným specialistou, který vám sdělí, jak a na které kmeny by bylo nejlepší testovat, s ohledem na stav pacienta a klinické příznaky.
Indikace pro vedení
Nejvýznamnějším důvodem, proč podstoupit PCR test na HPV, je přítomnost bradavic na těle.
Infekce tímto virem je možná pouze od osoby. Po průniku do krevního řečiště se patogenní mikroorganismus začne množit v horních vrstvách kůže, což vede k rozvoji charakteristických projevů - vzniku kondylomů nebo papilomů. Vzhledem k tomu, že toto onemocnění je poměrně časté a vyskytuje se u téměř 80 % populace, je pravděpodobnost nákazy extrémně vysoká. Papilomaviry se přenášejí prostřednictvím:
- nechráněný styk;
- při líbání;
- při porodu dítěte od mámy;
- v domácnosti;
- s blízkým kontaktem s pokožkou.
Hlavními indikacemi pro krevní test a PCR stěr na HPV jsou kožní příznaky tohoto onemocnění, které vypadají jako visící bradavice na tenkém stonku podobném niti. I když takové kondylomy nejsou na kůži pozorovány, virus může být stále přítomen v krvi, ale jeho průběh bude asymptomatický. Pokud je u pacienta diagnostikována papilomavirová infekce 18. a 16. podtypu, doporučuje se, aby byl pravidelně kontrolován odborníky, jako je gynekolog a urolog, podstoupil diagnostické procedury a nechal se testovat na HPV, protožePouze včasnou diagnózou je možné zabránit rozvoji některých druhů rakoviny.
Typy technik
V rámci PCR diagnostiky HPV byly vyvinuty čtyři hlavní testovací metody, z nichž každá má některé specifické rysy a je předepsána s přihlédnutím ke stavu nemocné osoby. K výběru nejlepší metody je nutná odborná rada. Takže čtyři způsoby:
- Kvalitativní metoda, která se používá k vyvrácení nebo potvrzení přítomnosti viru v těle. Jeho hlavní nevýhodou je nemožnost určit typ kmene HPV (pouze 14-21 typů). Nejčastěji se kvalitativní metoda používá současně s jinými metodami pro detekci papilomaviru. Výsledek je hlášen pomocí dvou hodnocení: „nenalezeno“nebo „detekováno“. To znamená, že tato technika buď uvádí přítomnost cizí DNA, nebo indikuje její nepřítomnost.
- Genotypizace je metoda, která dokáže určit přítomnost viru v lidském těle a stanovit jeho rozmanitost. Tato metoda se používá v případech, kdy je nutné zjistit, zda po léčbě zůstává DNA viru nebo je pozorován relaps v důsledku nové infekce. Genotypizace pomáhá vyhodnotit účinnost terapie určením typu HPV. Pokud se jedná o stejný kmen, na který byl pacient léčen, pak byla léčba neúspěšná. Pokud analýza prokáže přítomnost jiného typu HPV, může to znamenatreinfekce.
- Kombinovaná metoda, což je vysoce specializovaná diagnostická metoda založená na kombinaci kvalitativní detekce a detekce 16 kmenů pomocí genotypizace. Výsledek může být reprezentován 3 odpověďmi: „detekován kmen 16“, „nedetekován“a „HPV typ 16 včetně zjištěn“. Tato metoda se používá, když máte podezření na přítomnost typu papilomaviru, který může způsobit rakovinu děložního čípku u žen.
- Kvantitativní PCR metoda pro HPV s vysokým onkogenním rizikem, která umožňuje určit hladinu viru v krvi a sledovat jeho vývoj. Je považován za nejvíce informativní, protože vám umožňuje určit závažnost patologického procesu, na jehož základě je vybrána správná léčba. Technika je založena na stanovení počtu virových buněk v rámci studovaných 100 tisíc. Pokud je jejich součet vyšší než 5, znamená to vysokou koncentraci papilomaviru v těle, což zvyšuje pravděpodobnost rakovinných buněk. Pokud je množství menší než 3, koncentrace se považuje za zanedbatelnou.
Jak se připravit a složit test?
Krev lze brát jako biomateriál pro HPV, ale nejčastěji se odebírají sekrety z močové trubice u mužů a děložního čípku u žen.
Speciální příprava na PCR pro HPV není nutná. Hlavní podmínkou je nemočit pár hodin před zákrokem. Kromě toho je vhodné nemít pohlavní styk 2-3 dny před studií a nepít alkoholické nápoje. Zároveň nezapomínejte na procedury intimní hygieny.
Pro muže
Muži si udělají výtěr – hlava penisu a močová trubice jsou ošetřeny fyziologickým roztokem. Specialista používá speciální kartáček, který se zavede do močové trubice asi o 4 cm. Biologický materiál se odebírá mírnou rotací, umístí se do zkumavky a odešle se do laboratoře k výzkumu. Zároveň jej můžete skladovat nejdéle 2 dny od okamžiku vyzvednutí.
Ženy
Stěr pro PCR analýzu na HPV u žen se provádí následovně: sterilní roztok se aplikuje na děložní čípek, poté se kartáčkem odebere tampon z cervikálního kanálu. Zařízení se zavede do hloubky přibližně 1 cm, poté lékař rotačními pohyby oškrábe stěny kanálu. Biologický materiál se vloží do speciální zkumavky, kde zůstane asi 15 sekund. Specialista ji v ní otírá o stěny a poté ji vyjme. Dále je obsah zkumavky odeslán k laboratornímu testování.
Správný odběr vzorků materiálu pro výzkum je klíčem k úspěšné diagnóze a získání spolehlivého výsledku. Pokud je současně narušena sterilita a do zkumavky proniknou cizí mikroorganismy, může být během analýzy rozpoznán virus, který ve skutečnosti není v těle pacienta. K chybě může dojít také kvůli malému množství materiálu odebraného pro výzkum.
Kde vzít PCR na HPV, mnoho lidí zajímá. Vyšetření lze provést v jakémkoliv lékařstvíklinika nebo laboratoř, například v „Invitro“nebo „Hemotest“.
Výhody metody
PCR je jednou z hlavních diagnostických metod a v současnosti zůstává mezi lékaři nejoblíbenější. Tato studie se provádí nejen k detekci HPV, ale také umožňuje odhalit další patologické mikroorganismy, které mohou být přenášeny sexuálním kontaktem. Taková analýza pomáhá diagnostikovat skryté infekce, hepatitidu atd. PCR test na HPV má oproti jiným metodám detekce onemocnění řadu výhod. Tyto výhody jsou:
- Vysoká specifičnost. Analýza pomáhá s vysokou pravděpodobností oddělit stopy cizí DNA při studiu odebraného biomateriálu.
- Vysoký výkon. PCR studie je automatizovaný proces, který pomáhá provádět studii přímo v den analýzy. Tato rychlost umožňuje člověku, aby se dlouho nestaral o výsledky a dostal ho do rukou za pár dní.
- Vysoká citlivost. Testování umožňuje zkoumat aktivitu virů i během inkubační doby, kdy jsou jejich koncentrace velmi nízké. To pomáhá předcházet výskytu patologického procesu a zahájit včasnou terapii.
- Možnost provádění několika analýz najednou. Na základě jednoho odebraného vzorku krve lze provést diagnostiku k určení několika onemocnění najednou. Můžete například současněk identifikaci původce kapavky a chlamydií. Zároveň tento postup nebude moci negativně ovlivnit spolehlivost výsledku.
Chyby studie
Navzdory velké popularitě a informativnosti této analýzy existují některé negativní aspekty PCR diagnostiky pro HPV. Hlavní z nich je pravděpodobnost falešně pozitivních výsledků. K tomu dochází, když již byla terapie provedena, infekce byla zničena, ale mrtvé virové buňky stále zůstávají v tkáních těla. Obnova buněk nějakou dobu trvá. Pokud provedete studii dříve než 2-3 měsíce po léčbě, může PCR ukázat pozitivní výsledek. Technika nezaznamenává žádné rozdíly, protože je zaměřena na hledání virové DNA, kterou lze nalézt i v již mrtvých buňkách. To přispívá k falešně pozitivním výsledkům. Této situaci lze předejít, pokud se laboratorní test provede v časovém rámci stanoveném ošetřujícím lékařem.
Přepis
Co ukáže dešifrování PCR pro HPV?
Lékař by měl interpretovat výsledky testu. Je ale také důležité, aby si pacient uvědomoval strukturu výsledkové listiny. Pokud analýza ukazuje „DNA nebyla detekována“, pak v krvi není žádný papilomavirus. Pokud je indikátor Lg 5 nebo více, znamená to jeho vysokou koncentraci v krvi, Lg 3-5 - významné množství, méně než 3 - nevýznamné množství.
Falešně negativní analýza
Také,může dojít k falešně negativní analýze. Nastane, když:
- shromážděný biologický materiál byl nesprávně skladován nebo přepravován;
- byly porušeny sterilní podmínky a do přijaté krve pacienta se dostaly další mikroorganismy;
- kvůli nevhodnosti reagencií.
Aby se eliminovala možnost falešně negativních výsledků, je nutné pro tuto analýzu vybrat schválenou laboratoř s vysoce kvalifikovaným personálem.
Podrobně jsme zkoumali, jak a proč se provádí diagnostika PCR. Co to je, je nyní jasné.
