Annukleární protilátky jsou kategorií autoprotilátek, které když reagují s jádry tělních buněk, začnou je ničit. Proto je studium ANA považováno za poměrně citlivý marker v diagnostice autoimunitních poruch, z nichž většina je doprovázena lézemi pojivové tkáně. Některé z typů antinukleárních protilátek se vyskytují také u nemocí neimunitního původu: zánětlivé, infekční, maligní atd.
Jaké patologie jsou specifické?
Nejspecifičtější antinukleární protilátky proti následujícím patologiím:
- Systémový lupus erythematodes je onemocnění pojivové tkáně a kůže.
- Dermatomyozitida – poškození svalů, kůže, kosterní tkáně atd.
- Sklerodermie – ztluštěnípojivová tkáň.
- Periarteritis nodosa je zánětlivý proces postihující arteriální cévní stěny.
- Revmatoidní artritida – poškození pojivové tkáně a kloubů.
- Sjögrenova choroba - poškození tkáně se žlázovými projevy (snížení sekrece slinných a slzných žláz).
Kdy je screening antinukleárních protilátek pozitivní?
Autoimunitní patologie
Autoimunitní patologie, kdy imunitní systém zahájí útok na vlastní buněčné tkáně, jsou v klinické medicíně považovány za nejnebezpečnější. Většina autoimunitních onemocnění je klasifikována jako chronická a může způsobit vážné dysfunkce vnitřních orgánů.
Jedním z běžných testů používaných při diagnostice různých autoimunitních stavů je test na hladinu antinukleárních protilátek (antinukleární), který se provádí třemi způsoby:
- Metoda ELISA, která určuje celkovou hladinu protilátek;
- reakční metoda nepřímé imunofluorescence RNIF, pomocí které lze detekovat až 15 typů protilátek;
- imunoblotovací metoda.
Annukleární protilátkový imunoblot
Toto je laboratorní test krve na přítomnost protilátek proti HIV. Je to přesnější analýza než ELISA a používá se k potvrzení výsledku ELISA. Imunoblotting (western blot) se používá v diagnostice infekcí HIV, stanovení hladiny antinukleárních protilátek, vjako pomocná expertní metoda, která je určena k potvrzení výsledku ELISA. Pozitivní výsledky ELISA jsou touto metodou zpravidla dvakrát kontrolovány, protože je považována za specifičtější a citlivější.
Imunitní blotting kombinuje enzymovou imunoanalýzu s elektroforetickou gelovou separací virových proteinů a jejich přenosem na nitrocelulózové membrány. Imunoblot se skládá z několika fází. Nejprve se vyčištěný a zničený protein podrobí elektroforéze, při které se antigeny obsažené v jeho složení rozdělí na molekuly. Poté se blotováním antigeny přenesou z gelu na nylonový filtrační proužek nebo nitrocelulózu, které obsahují specifické spektrum proteinů.
Poté se na proužek nanese testovací materiál, a pokud jsou ve vzorku přítomny specifické protilátky, začnou se vázat na jim odpovídající proužky antigenu. Výsledek takové interakce je viditelný. Přítomnost proužků v některých oblastech proužku potvrzuje přítomnost protilátek proti určitým antigenům ve vyšetřované krvi. Imunoblotting se často používá k potvrzení infekce HIV. Krevní séra jsou považována za pozitivní, pokud jsou imunoblotem detekovány protilátky proti dvěma obalovým proteinům HIV. Pokud je screening pozitivní, pak se v těle rozvíjí specifické autoimunitní onemocnění.
Možná onemocnění
Annukleární antinukleární protilátky lze pozorovat u více než 1/3 pacientů s recidivující chronickou hepatitidou. Kromě toho se hladina ANA může zvýšit v případě rozvoje následujících patologií:
- infekční mononukleóza (virové onemocnění, které způsobuje masivní poškození vnitřních orgánů);
- leukémie (zhoubné onemocnění krve) v akutní a chronické formě;
- hemolytická anémie (chudokrevnost způsobená destrukcí červených krvinek);
- Waldenströmova nemoc (postihuje kostní dřeň);
- cirhóza jater (chronická patologie spojená se změnami ve strukturách jaterní tkáně);
- malaria;
- lepra (infekce kůže);
- chronické selhání ledvin;
- trombocytopenie (snížená tvorba krevních destiček);
- lymfoproliferativní patologie (nádory v lymfatickém systému);
- myasthenia gravis (svalová únava);
- thymom (nádor brzlíku).
Hladiny imunoglobulinů
Současně s hodnocením hladiny antinukleárních antinukleárních protilátek v průběhu analýzy je hodnocena hladina imunoglobulinů: IgM, IgA, IgG. Detekce těchto složek v krvi může naznačovat vysoké riziko kolagenózy a revmatických onemocnění.
V případech, kdy je nalezena souvislost mezi hladinou protilátek a symptomy u pacienta, je přítomnost antinukleárních protilátek v krvi sama o sobě diagnostickým znakem a může ovlivnit volbu terapeutické techniky pro konkrétní onemocnění. Uchování vysoké koncentrace antinukleárních protilátek během dlouhého průběhuterapie ukazuje na extrémně nepříznivou prognózu pro pacienta. Pokles hodnot na pozadí probíhající terapie může znamenat období remise nebo blížící se úmrtí.
Kromě toho lze antinukleární protilátky detekovat u zdravých lidí ve 3–5 % případů – do 65 let a ve 37 % případů – po 65 letech.
Indikace pro stanovení úrovně ANA
Testování antinukleárního faktoru je nutné v následujících případech:
- v diagnostice autoimunitních a jiných systémových onemocnění bez závažných příznaků;
- v komplexní diagnostice systémového lupus erythematodes, jeho stadia a formy, jakož i ve volbě terapeutické taktiky a prognózy;
- v diagnóze lupus vyvolaného léky;
- při preventivním vyšetření pacientů s lupus erythematodes;
- v přítomnosti specifických příznaků: dlouhotrvající horečka bez konkrétní příčiny, bolest a bolesti svalů, kloubů, kožní vyrážky, vysoká únava atd.;
- pokud existují příznaky systémových patologií: poškození vnitřních orgánů nebo kůže, artritida, křeče, epileptické záchvaty, horečka, horečka;
- při předepisování medikamentózní terapie hydralazinem, disopyramidem, propafenonem, ACE inhibitory, prokainamidovými beta-blokátory, propylthiouracilem, lithiem, chlorpromazinem, karbamazepinem, isoniazidem, fenytoinem, hydrochlorothiazidem, minocyklinem, statiny, protože existuje možnost léku indukovaný lupus erythematodes.
Konzultace s lékařem
Kromě praktického lékaře je možné konzultovat a získat doporučení k výzkumu od takto úzkých specialistů:
- dermatovenerolog;
- revmatolog;
- nefrolog.
Jaká je norma pro antinukleární protilátky?
Dešifrování výsledků, patologických a normálních ukazatelů
Normálně antinukleární protilátky v plazmě obvykle chybí nebo jsou detekovány v malých množstvích. Výsledek závisí na metodě provedení testu:
1. ELISA:
- méně než 0,9 bodu – normální (záporné);
- 0, 9-1, 1 bod – pochybný výsledek (doporučuje se znovu otestovat po 14 dnech);
- více než 1, 1 bod – kladný výsledek.
2. Pro analýzu RNIF je titr menší než 1:160 považován za normální výsledek.
3. Při imunoblotování je norma „nedetekována“.
V jakých situacích může být test na antinukleární protilátky pozitivní?
Jaké faktory mohou ovlivnit výsledek?
Seznam faktorů, které přispívají ke zkreslení laboratorních výsledků, zahrnuje:
- porušení norem přípravy na analýzu nebo algoritmus venepunkce;
- užívat farmakologické léky (methyldopa, karbamazepin, penicilamin, nifedipin, tokainid atd.);
- Přítomnost urémie u pacienta často dává falešně negativní výsledek.
Interpretace výsledků se provádí složitým způsobem. Stanovte přesnou diagnózuna základě jediného diagnostického testu není možné.
Příprava
Venepunkce se provádí ráno nalačno (od okamžiku jídla by mělo uplynout 8 hodin). Můžete pít pouze vodu. Před odběrem krve se nedoporučuje používat nikotinové náhražky a kouřit. V předvečer a v den studia nemůžete pít energetické a alkoholické nápoje, dělat fyzickou práci a dělat si starosti. 15 dní před testováním se po dohodě s lékařem ruší užívání léků (antivirové a hormonální přípravky, antibiotika atd.). Pro získání správného výsledku se doporučuje analýzu opakovat po 2 týdnech.
Usoudili jsme, že se jedná o screening na antinukleární protilátky.
