Aglutinace krve je aglutinace a sedimentace červených krvinek, bakterií a dalších buněk, které nesou antigeny.
Proces probíhá pod vlivem aglutininů, což jsou specifické látky. Jako tyto látky působí lektiny nebo protilátky.
Možné typy aglutinace při určování krevní skupiny
Aglutinace je specifická a nespecifická. V prvním případě probíhá reakce za účasti tří složek:
- antigens;
- protilátky;
- elektrolyty (použijte izotonický roztok).
Při určování krevní skupiny se používají všechny možné typy aglutinace, ale není to jediný případ.
K jakému účelu se používá?
Krevní aglutinační test se používá k identifikaci původce infekčního onemocnění. Zároveň se usazuje a v sedimentu je snadné jej odhalit. Tento proces se používá, jak již bylo zmíněno výše, při určování krevní skupiny. To je to, o čem budeme diskutovat příště.
Jaké jsou funkce?
Erytrocyty obsahují antigeny typu A a B. Onise váží na protilátky ά a p, v daném pořadí. Krevní skupiny a aglutinační reakce:
- 1, 0 (ά, β) - žádné antigeny na povrchu erytrocytů;
- 2, A (β) – přítomen antigen A a protilátka β;
- 3, B (ά) – obsahuje antigen B a protilátku ά;
- 4, AB (00) – dva antigeny, žádné protilátky.
Za zmínku stojí, že antigeny jsou pozorovány již v embryu. Pokud jde o protilátky, objevují se po narození, v prvním měsíci života.
Kompatibilita lidí závisí na krevní skupině. To je důvodem odmítnutí plodu tělem matky. Jinými slovy, má protilátky proti krevním antigenům nenarozeného dítěte. V tomto případě dochází k nekompatibilitě. Při transfuzi je navíc nutné vzít v úvahu krevní skupinu.
Příprava
Krevní skupiny a aglutinační reakce jsou kompatibilní pojmy, které se často používají v medicíně.
Před testem je důležité dodržovat určité pokyny. Je nutné dočasně vyloučit užívání některých potravin a léků. To pomůže zpřesnit výsledky. Doporučení, která je třeba dodržovat, předepisuje lékař. Faktem je, že různé laboratoře nemusí mít stejné rozsahy získaných hodnot, to znamená, že se mírně liší.
Testovací podmínky
Aby bylo možné přesně určit krevní skupinu, je důležité zvolit správné vybavení. Patří mezi ně:
- fyziologický roztok a pipeta;
- skleněné tyče;
- standardní isohemaglutinační séra;
- suché kameninové talíře, které jsou rozděleny do 4 sektorů.
Na podmínky testu jsou kladeny požadavky:
- denní světlo;
- teplota místnosti nad +16 ˚С;
- použití objemů krve a séra v poměru 1:10;
- Spolehlivé výsledky do 5 minut.
Výše uvedené jsou hlavní podmínky a nástroje. Krevní aglutinace může být provedena několika způsoby a každý z nich klade individuální požadavky.
Metody
Možné metody pro určení krevní skupiny pomocí aglutinace:
- standardní metoda;
- cross-reaction;
- použití tsoliklonů;
- expresní metoda pomocí sady „Erythrotest-Groupcard“.
Standardní metoda
Aglutinace krve se projevuje pomocí červených krvinek pacienta. Používají se také standardní séra, která obsahují známé antigeny.
Jedna kapka čtyř sér se umístí na plochý talíř. Poté se na něj pomocí skleněných tyčinek nanese vyšetřovaná krev pacienta. V tomto případě je vhodné použít kapátka. Poměr by měl být 1:10. Sérum a krev se jemně promíchají. Vyhodnocení lze provést do pěti minut.
Dešifrování výsledků testů jednoduchou metodou
Po zadané doběv kapkách séra je pozorováno osvícení. U některých můžete vidět, že došlo k aglutinaci erytrocytů (malé vločky), u jiných chybí.
Existují následující možnosti:
- žádná reakce ve všech vzorcích séra − 1 skupina;
- srážení se objevilo všude kromě 2. vzorku - skupina 2;
- žádná reakce pouze ve 3. vzorku - 3. skupina;
- aglutinace se vyskytla všude – skupina 4.
Hlavní věcí je tedy správně distribuovat sérum. Pak nebude těžké rozluštit výsledek. Pokud je aglutinace krve slabá, doporučuje se provést test znovu. V případě malých vloček se zkoumají pod mikroskopem.
Křížová reakce
Někdy je nemožné přesně určit krevní skupinu jednoduchým způsobem. Aglutinace se v tomto případě provádí metodou křížové reakce. Na rozdíl od první verze testu jsou zde důležité standardní erytrocyty. Krev pacienta se odebere do zkumavky, odstředí a poté se sérum odčerpá pipetou pro další výzkum.
Na misku se umístí v množství 2 kapek, poté se k ní přidají standardní červené krvinky skupiny A a B. Obsah se promíchá třepáním nádoby.
Výsledky metody křížové reakce
Po pěti minutách jsou vzorky připraveny ke kontrole. Možnosti jsou:
- k lepení došlo u obou kapek – 1 skupina;
- vločky nejsoupozorováno v žádném ze vzorků – skupina 4;
- proces je viditelný v jednom vzorku - 2 nebo 3 skupiny (podle toho, kde přesně se krev srazila).
Coliclon metoda
K určení krevní skupiny se aglutinace tímto způsobem provádí pomocí syntetických náhražek séra. Říká se jim tsoliklones. Obsahují umělé náhražky za ά a β-aglutiny známé jako erythrotesty (růžové a modré). Reakce probíhá mezi nimi a červenými krvinkami pacienta.
Tato metoda je nejpřesnější a nejspolehlivější. V zásadě nevyžaduje opětovné vyšetření. Vyhodnocení výsledků se provádí stejným způsobem jako v případě standardní metody. Zvláštností je, že čtvrtá krevní skupina musí být nutně potvrzena reakcí se specifickou syntetickou náhražkou (anti-AB). Navíc nevykazuje lepení, když je přidán roztok chloridu sodného.
Expresní metoda se sadou „skupinových karet Erythrotest“
Vzhledem k možným metodám analýzy při určování krevní skupiny stojí za zmínku, že tato metoda má své vlastní charakteristiky. Spočívají v tom, že výsledek lze hodnotit nejen v laboratoři, ale i v terénu. Pro studium se používá speciální sada. Obsahuje kartu jamky se sušenými činidly, která jsou již na dně. Kromě anti-AB, anti-A a anti-B se k určení Rh faktoru používá anti-D.
Tato metoda nevyžaduje speciální přípravu, je povoleno používat krev odebranou z prstu, je povolena přítomnost konzervačních látek v ní. Nejprve musíte do každé jamky přidat kapku vody, aby se přísady rozpustily. Poté se přidá krev za mírného míchání. Za tři minuty obdržíte výsledek.
Falešná aglutinace
Někdy údaje získané po testu nejsou pravdivé. Tento jev závisí na určitých faktorech.
Existují tři typy falešných reakcí:
- Pseudoaglutinace. Ke skutečnému navázání nedochází, erytrocyty se jednoduše složí ve formě sloupců mincí. Pokud přidáte pár kapek fyziologického roztoku, rozpadnou se. Podobný jev je rozpoznán pod mikroskopem.
- Studená aglutinace krve. Taková reakce je pozorována, pokud podmínky pro studii byly nepříznivé. Když je teplota nižší než +16˚C, může dojít ke slepení.
- Panaaglutinace. Pokud je v krvi infekce, výsledky testů mohou být falešné. Tento jev je také možný v případě onkologických onemocnění se sepsí.
Aglutinace je v medicíně velmi důležitá. Umožňuje nejen určit krevní skupinu, ale také identifikovat původce onemocnění a také přítomnost infekcí. Hlavní věcí je při přípravě na tento postup dodržovat doporučení lékaře. S ohledem na zdravotnický personál je jejich úkolem vytvářet příznivé podmínky adodržování všech pravidel. Jedině tak dosáhnete přesných výsledků při provádění krevní aglutinace.
